小鼠II型肺泡上皮細胞分離自肺組織;肺泡肺內(nèi)最基本的呼吸單位,是氣體交換的主要場所,是多面形的薄膜囊泡,一面與肺泡囊或肺泡管相通,其他各面與肺泡毛細血管網(wǎng)或相鄰的肺泡相接。
肺泡壁表面覆蓋有肺泡上皮,肺泡之間有一薄層結締組織,內(nèi)含豐富的毛細血管網(wǎng)及大量的彈力纖維和巨噬細胞,肺泡壁上有小孔,稱肺泡孔,肺泡與毛細血管間的隔膜稱氣血屏障,它十分菲薄,由毛細血管內(nèi)皮、基底膜和肺泡上皮、基底膜及其間彈力纖維、膠原纖維等組成,肺泡細胞又叫粒性細胞、大肺泡細胞,系肺泡上皮細胞的一種。
小鼠II型肺泡上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合灌注消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,是肺細胞的主要類型之一,可用于分析肺上皮細胞對外界因素的反應,對于研究肺的發(fā)育、損傷和修復。
次分離小鼠肺泡上皮細胞是很棘手的,肺上皮細胞周圍有大量的白細胞和內(nèi)皮細胞需要分離。更復雜的是需要通過分散酶消化而從肺的細胞外基質(zhì)中釋放出來,分散酶能特異性地裂解存在于基底膜中的IV型膠原蛋白和纖連蛋白,需要通過氣管艱難地注入,是各高校及研究的細胞學、免疫學、病理學、生物醫(yī)學、臨床醫(yī)學等實驗室常備細胞。
肺泡上皮細胞體形極微,表面有由磷脂雙分子層與鑲嵌的蛋白質(zhì)及糖被構成的生物膜,內(nèi)含遺傳物質(zhì),無機物有機物兩大類化學物質(zhì)。細胞增殖是以一分為二的形式進行分裂,通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物,是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群,將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使肺泡上皮細胞|細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。